ABSTRACT
The kinetics of 2-aminofluorene [AF] and 4-Aminobiphenyl [4-AB] N-hydroxylase reactions were determined using eight highly purified forms of rabbit liver cytochrome-P450 [Cyt-P450], with control and 2,3,7,8-tetrchloro-dibenzo-p-dioxin [TCDD] induced rabbit lung and liver microsomes.Both AF and 4-AB N-hydroxylases were best defined by two enzymatic systems, showing a high affinity and low capacity and a low affinity; high capacity system in control and TCDD pretreated microsomes. TCDD pretreatment differently modifies the apparent Km and Vmax. of the arylmine N-hydroxylases in the two tissues microsomal enzymes and in a substrate-dependent manner. Cyt-P450 [form 4] showed the following AF N-hydroxylase activity: 3417 +/- 326 pmol N-OH-AF/nmol Cyt-450/min. In contrast to the microsomal situation, the kinetics studies of AF and 4-AB N-hydroxylases with the form 4, were best described by one enzymatic system.
Subject(s)
Animals, Laboratory , Amines/pharmacokinetics , Cytochrome P-450 Enzyme System/pharmacokinetics , Microsomes , Microsomes , Rabbits , Mixed Function OxygenasesABSTRACT
Se ha efectuado un estudio cualitativo, usando una serie de reacciones para el reconocimiento y diferenciacion de los distintos tipos de aminas, así como el estudio comparativo entre los métodos volumétricos para la cuantificación de aminas, aprovechando su propiedad básica y el diferente comportamiento del grupo funcional amino frente a algunos reactivos. Se usaron métodos acidimétricos, basados en la titulación de las muestras como base, propiedad que en ciertas condiciones en cuantitativa. Los resultados obtenidos muestran que los métodos basados en reacciones de acilación, son los más convenientes para ser aplicadas a todas las aminas primarias y secundarias ensayadas.